细胞净化(支原体污染清除) 
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    细胞净化(支原体污染清除)
    发稿时间:2017-08-10 10:54:22  【字体:      

    什么是支原体污染?
          
    支原体是一类无细胞壁,形状呈高度多形性,可为圆形、丝状或梨形,其直径仅有0.13~0.18μm,故能经过滤菌器,因此过滤除菌不能够抵御支原体的入侵。而且,至今为止没有有效的药物能彻底杀灭支原体。支原体与细胞能够长期共存,换种说法是支原体能够“潜伏”存在,支原体能够一直伴随着细胞的生长代谢,当支原体的增殖速度加快时,能够耗尽营养物,推动代谢堆集,致使pH改动,对细胞构成多种影响,包括改变生长状况、生化特性、代谢等,当支原体爆发性生长时,想要挽救被感染的细胞几乎是不可能的。

    细胞支原体污染是国内实验室细胞培养中普遍存在的问题,保守估计支原体污染率抵达50~60%。当细胞被支原体污染后,细胞生长状态变差,倍增时间延长乃至无法生长;细胞内的DNA、RNA及蛋白表达均能够发生改变,严重干扰实验结果的可信度。支原体的可传播特性将会为实验室埋下一颗隐形的定时炸弹,因此,定期进行支原体检测,确保无支原体污染的细胞培养体系,才能获得准确有效的实验数据。

     

         典型的支原体污染来源?

    1、细胞之间交叉污染;
    2、工作环境或实验器材的污染;
    3、实验者无菌操作不佳或操作者本身的污染(某些支原体在人体是正常菌群如口腔中的支原体);
    4、培养基、血清或其他试剂污染;
    5、制备细胞的原始组织或器官的污染;

    6、空气传播,当培养箱中有细胞支原体污染严重时,会很快波及其他细胞。

     

    支原体污染后的现象

    1、由于支原体的直径仅有0.13~0.18μm,常规显微镜下无法观察支原体的存在,细胞被支原体污染后,培养液不会变浑浊,最典型的特征是,细胞碎片增多,细胞周围出现黑色小点,严重时呈“细沙”状,细胞空泡化,出现类似细胞凋亡现象,最终细胞漂浮,完全死亡。可以通过细胞换液、传代得到暂时缓解,但最终趋向死亡,下图为典型的支原体污染后的细胞状态图片。


     

    2、支原体污染的一种常规检测方法是对细胞进行DAPI染色,在支原体污染的细胞中除了观察到正常的细胞核,细胞质也有大量的絮状核酸物质被染成蓝色,这些处于细胞质的核酸物质就是支原体DNA,说明细胞支原体污染非常严重。

     

     

    细胞培养遇到支原体污染,怎么办???

     

    隆重推出,在体成瘤净化细胞支原体污染方案!

     

    方案流程:

     

    方案优势: 彻底清除!

     温馨提示:该方案目前仅适用于肿瘤细胞和杂交瘤细胞支原体感染清除净化!


    方案测试报告(以MG63细胞株为例):

     


     


     

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