基因过表达、突变、敲降等稳转细胞株构建服务 
PPL质粒与蛋白共享库

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    基因过表达、突变、敲降等稳转细胞株构建服务
    发稿时间:2017-07-07 10:43:58  【字体:      

    PPL质粒共享库基于其庞大的慢病毒质粒库、CART研发平台,对外提供稳转细胞株构建与筛选服务。


    服务项目:
          基因过表达、突变、敲降等稳转细胞株构建,每株≧106个细胞。

     

    服务流程:

          1、载体构建:将外源基因(CDS、突变或干扰靶点序列)构建到慢病毒载体上(荧光、筛选抗性可选)。PPL质粒库有现成模板的,免费提供。没有现成模板的,需要客户提供,或由我们另外合成,费用另计。

             2、预实验:客户提供靶细胞,我们进行靶细胞培养(特殊细胞需要客户提供培养基); 使用对照病毒感染靶细胞,测定细胞易感度; 同时筛选7天细胞全部死亡的抗生素浓度,作为筛选浓度。

     3、慢病毒包装:使用合适的慢病毒包装体系,包装满足筛选要求的慢病毒滴度液。
            4
    、细胞感染:使用包装好的慢病毒滴度液,参考预实验感染体系感染靶细胞。
            5
    、抗生素筛选。

            6、细胞筛选后培养放大。
            7
    、鉴定筛选结果:提供qPCRWB检测验证。需要客户提供有效的WB抗体。
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