细胞永生化(cell
immortalization) 指体外培养的细胞经过自发的或受外界因素的影响从增殖衰老危机中逃离, 从而具有无限增殖能力的过程. 自发永生化的几率非常小, 啮齿类动物为10-5~10-6, 而人类细胞则更为罕见, 小于10-12. 通过基因转染等技术将外源性永生化基因, 如病毒、原癌基因和抑癌基因突变体等, 导入目的细胞内, 以增加永生化的发生率, 进而建立永生化细胞株(immortalized cell strains), 以达到使体外培养的细胞具有无限 增殖能力且细胞间无差异的目的。
细胞永生化的研究意义：
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了解细胞增殖与衰老的分子机制；
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为研究治疗肿瘤、控制肿瘤细胞增殖以及器官移植等奠定基础；
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可使传代困难、增殖慢、易衰老的细胞获得永生，获得更多的细胞资源。
1、永生化之病毒工具
备注：SV40 Large
T (tsA58)：SV40大T抗原的温度敏感突变株tsA58表达的蛋白在允许温度（permissive temperature）33℃下有活性，在非允许温度（non-permissive temperature）39℃下失活，因而用SV40 Large
T (tsA58) 永生化的细胞系具有永生化和温控性双重特性。
2、永生化之端粒
3、永生化之原癌基因
4、永生化之抑癌基因
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cDNA克隆
pLenti-SV40 Large T慢病毒滴度液
